Em Assassins Creed: The Brotherhood novamente o jogador entrará na pele de Ezio que tenta novamente acabar com a família Borgia de Roma, com Cesare Borgia como vilão principal do jogo.
Assassins Creed: The Brotherhood dessa vez se passa apenas em Roma, mas a extensão será quatro vezes maior que Veneza, e a cidade estará dividida em quatro distritos. Agora Ezio poderá recrutar personagens que estejam andando pela cidade para ajudá-lo em missões, e todos os pontos de experiência ganhos serão utilizados para melhorar suas habilidades.
O sistema de combate deve ser bem similar como vimos em Assassins Creed II, com alguns movimentos novos como: matar rapidamente vários inimigos ao mesmo tempo, ou para assassinar o oponente sem sair de cima de seu cavalo.
Os itens e as localizações secretas vistas em Assassins Creed II irão mais uma vez estar presentes neste jogo. Leonardo Da Vinci também estará de volta em Assassins Creed: The Brotherhood e traz com ele novos inventos.
Mas a grande novidade presente em Assassins Creed: The Brotherhood é seu modo multiplayer, que incluiu um modo versus, por equipes e por objetivos. Existem classes com armas e objetivos únicos para cada classe e o sistema de pontos vai permitir melhorar o nível dos personagens. Até oito jogadores poderão participar das campanhas online.
O trailer e apresentando a versão beta do jogo que e exclusiva do PS3:
